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TEM成像原理:电子显微镜的奥秘 TEM(透射电子显微镜)的成像原理其实和普通的光学显微镜有点类似,但也有一些关键的区别。让我们先来回顾一下光学显微镜的成像原理吧。 光学显微镜的成像原理 在光学显微镜中,光源(比如电灯泡)发出可见光,经过聚光镜调整后,透射穿过薄切片。当光束穿过样本时,样本的结构会吸收或阻挡光线,从而带上这些结构的信息(比如明暗、颜色等)。这些带有结构信息的光束被物镜和中间镜放大,最后通过目镜调整,我们就可以用肉眼观察或者用相机拍照了。 TEM的成像模式 TEM的成像模式和光学显微镜有点类似,但主要有三个关键区别: 射线源:TEM的射线源不是普通的灯泡,而是高压电子枪,发出的是高速电子束而不是可见光束。 磁场偏转:在TEM中,用来实现电子束偏转的是磁线圈。磁线圈中央产生磁场,电子束穿越时会被“旋进”。就像中学物理课本里学到的那样,运动的带电物体在磁场中会受洛伦兹力影响,改变前进路线。所以,我们可以把电镜的磁线圈称为“电磁透镜”。 真空环境:由于电子的穿透力很弱,碰到空气分子就会被弹开,所以TEM的镜筒内必须保持接近真空的状态。 结构对比 튊TEM和光学显微镜的结构也有一些相似之处。它们都有聚光镜(在样本平面之前,名曰“聚光”,实际上是“聚电子”)、物镜和中间镜的构造。 外形对比 슊明场光镜和TEM的外形结构也有很大的不同。光学显微镜看起来更像是普通的光学仪器,而TEM则更像一个复杂的电子设备。 总的来说,TEM的成像原理虽然和光学显微镜有些相似,但由于电子的特性,它们在工作方式和结构上还是有很多独特的区别。希望这篇文章能帮你更好地理解TEM的成像原理!
透射电子显微镜(TEM)工作原理详解 透射电子显微镜(TEM)是一种高分辨率、高放大倍数的显微镜,它使用聚焦电子束作为照明光源,通过透射电子成像。TEM的核心在于使用对电子透明的薄膜试样(厚度在几十到几百纳米之间),以透射电子为成像信号。 成像原理 TEM的成像原理与普通光学显微镜相似,但用电子束代替光束。电子枪发射出的电子束在真空通道中沿着镜体光轴穿越聚光镜,形成一束尖细、明亮且均匀的光斑,照射在样品上。样品内部的致密部分透过的电子量少,稀疏部分透过的电子量多。经过物镜的会聚调焦和初级放大后,电子束进入下级透镜进行综合放大成像,最终被放大了的电子影像投射在观察室的荧光屏上,转化为可见光影像供使用者观察。 젥辨能力 分辨能力是显微镜的重要性能指标,定义为能清楚分开两个物点的最小距离。人眼的分辨能力约为0.2毫米,而光学显微镜在使用尽量大的孔径角和尽量高折射率的物质浸没物镜时,由于可见光波长(约390到700纳米)的限制,其极限分辨能力只有200纳米,有效放大倍数约为1000倍。科学家曾考虑过用波长更短的紫外线和X射线作为显微镜光源,但效果并不理想。 ᠧ显微镜的优势 电子显微镜的分辨力可达0.2nm,远高于光学显微镜。这是因为电子束的波长比可见光和紫外光短得多,并且波长与发射电子束的电压平方根成反比,电压越高波长越短。这使得TEM成为观察和分析材料形貌、组织和结构的强大工具,可实现微区物像分析、高的图像分辨率和立体丰富的信息。 通过了解TEM的工作原理和结构,我们可以更好地理解和应用这种先进的显微技术,为科研工作提供有力的支持。
电子显微镜和光学显微镜的区别详解 显微镜是一种有着300多年历史的精密光学仪器,自从它问世以来,人们就能看到许多肉眼无法分辨的微小生物,了解了生物学的基本单位——细胞。如今,不仅有能放大几千倍的光学显微镜,还有能放大几十万倍的电子显微镜,让我们对生物体的生命活动规律有了更深入的了解。 光学显微镜:可见光的魔法 学显微镜是一种利用光学原理将人眼无法分辨的微小物体放大成像的光学仪器。它的工作原理是通过可见光(如太阳光或白炽灯光)照射样品,然后通过一系列透镜将图像放大,最终在目镜中形成清晰的图像。 电子显微镜:电子的奇妙之旅 电子显微镜则利用电子束作为照明光源,通过电子流在样品上的透射或反射以及电磁透镜的多级放大,最终在荧光屏上成像。与光学显微镜不同,电子显微镜使用的照明光源是电子枪发出的电子流,由于电子流的波长比光波短得多,因此电子显微镜的放大倍数和分辨率都远高于光学显微镜。 成像原理的不同𘊥觔显微镜中,作用在被检样品上的电子束被电磁透镜放大,然后打在屏幕上成像或作用在照相胶片上成像。电子强度不同的机理是,当电子束作用于待测样品时,入射电子与物质的原子发生碰撞而散射。而在光学显微镜中,物像是由亮度差呈现的,亮度差是由被测样品不同结构吸收的光的差异造成的。 样品制备方法的差异슧褺电子显微镜观察的组织和细胞标本的制备过程非常复杂,技术上困难且昂贵。在材料提取、固定、脱水和包埋等步骤中需要特殊的试剂和操作。最后,需要将组织块放入超薄切片机中,切成厚度为50~100 nm的超薄标本。而在光学显微镜下观察的标本则相对简单,一般放在载玻片上,如普通组织切片标本、细胞涂片标本、组织压片标本和细胞滴片标本等。 不同光源的魅力 电子显微镜使用的照明光源是电子枪发出的电子流,而光学显微镜的照明光源是可见光(如太阳光或白炽灯光)。由于电子流的波长比光波短得多,因此电子显微镜的放大倍数和分辨率都远高于光学显微镜。 不同镜头的选择 在电子显微镜中起放大作用的物镜是电磁透镜(能在中心部分产生磁场的圆形电磁线圈),而光学显微镜的物镜是由玻璃制成的光学透镜。电子显微镜中有三组电磁透镜,它们相当于镜中的聚光镜、物镜和目镜。 通过了解这些差异,我们可以更好地选择适合自己实验需求的显微镜类型,从而更深入地探索微观世界的奥秘。
透射电镜忘关灯丝 分析原理: 透射电子显微镜(TEM)通过电子枪发射电子束,在真空通道中沿镜体光轴穿越聚光镜,形成一束尖细、明亮且均匀的光斑,照射在样品室内的样品上。样品内部的致密区域透过的电子量少,稀疏区域透过的电子量多。经过物镜的会聚调焦和初级放大后,电子束进入下级透镜和投影镜进行综合放大成像,最终被放大的电子影像投射在观察室内的荧光屏板上,荧光屏将电子影像转化为可见光影像以供观察。 样品要求: 厚度不超过100nm 粉体、液体样品可测试,薄膜或块状样品需另行制样(如离子减薄、包埋切片、FIB等) 制样时一般选用普通铜网或微栅铜网,颗粒直径小于10nm的样品需用超薄碳膜制样 若样品含Cu,需拍EDS能谱和mapping时可选镍网或钼网 常用溶剂为乙醇,其次是水(易挥发,不会在碳膜上留下痕迹),其他溶剂(如甲苯、丙酮等)如需自备 超声时间默认5min,如有特殊要求请提前说明 样品制备注意事项: 仅针对材料类样品,生物样品另作说明 样品需无毒、无放射性、干燥无污染、热稳定性好、耐电子束轰击 样品中是否含有有机物:有机物在高压下不稳定,拍摄过程中极易被打散,会污染仪器。如需拍摄,请务必与工作人员确认。带有机物的样品无法拍摄mapping 样品是否有磁性:磁性颗粒易吸附到极靴上,原则上电镜(TEM)不拍磁性样品。根据不同老师的经验,对所拍样品中磁性强弱的接受度不同,请如实填写样品是否含磁及磁性的强弱 测试流程: 现场测试:不能现场测试样品,但可以通过云视频进行测试 寄样测试:会给到您一个测试单,您需写清楚制样要求(分散剂、超声时间、铜网等)、测试要求(标尺、拍摄位置、形貌效果等)、测试目的等,测试老师会按您的要求来拍摄 图片提供: 每样品提供8-10张左右形貌图,5张左右高分辨图,具体根据样品的拍摄情况而定
能看清微观世界的显微镜,令人惊叹的科学工程
TEM和SEM的区别,你真的知道吗? 扫描电子显微镜(SEM)和透射电子显微镜(TEM)是两种在科研和工业中广泛使用的电子显微镜技术。它们各自拥有独特的成像原理和应用领域。 젓EM(扫描电子显微镜) 工作原理:SEM通过聚焦电子束扫描样品表面,利用样品表面受电子束激发产生的二次电子或背散射电子来形成图像。这些信号被探测器收集并转换成图像,从而展示样品的表面形貌和成分。 分辨率:SEM的分辨率一般在纳米到亚微米级别,非常适合观察样品的细微表面结构。 样品准备:SEM对样品的厚度没有严格要求,但通常需要进行表面导电处理,以避免电荷积累影响成像质量。样品可以通过切、磨、抛光等方法制备表面。 应用领域:SEM广泛应用于材料科学、地质学、生物学、医学等领域,用于观察样品的表面形貌、微观结构和进行成分分析。 젔EM(透射电子显微镜) 工作原理:TEM利用电子束穿过样品,通过样品内部结构对电子束的衍射和散射来成像。电子束的波长比可见光短得多,因此TEM具有更高的分辨能力,能够提供高分辨率的原子级内部结构信息。 分辨率:TEM的分辨率通常比SEM高,可以达到原子级别,适用于观察样品的内部结构。 样品准备:TEM对样品的要求更高,通常需要将样品制备成非常薄(几十纳米甚至更薄)的膜,以便电子束能够穿透。 应用领域:TEM常用于材料科学、生物学等领域,用于研究物质的微观结构、晶体学、化学成分等。 总结 SEM和TEM在成像原理、分辨率、样品制备要求和应用领域上有所区别。SEM适用于观察样品的表面形貌和进行成分分析,而TEM则更适用于高分辨率的内部结构研究。在选择使用哪种显微镜时,需要根据具体的研究目的和样品特性进行考虑。
Annexin V-PI染色,测凋亡! 细胞凋亡是生物学中一个复杂但至关重要的过程,它涉及多种分子和染色方法。其中,Annexin V-PI染色是一种相对简单的双染方法,用于检测细胞凋亡。让我们深入了解一下这种方法的工作原理和操作步骤。 细胞凋亡的标志 细胞凋亡过程中,细胞核会变形、浓缩、碎裂,这可以通过Hoechst染色或DAPi染色来观察。此外,细胞膜也会发生变化,部分膜会包裹细胞内容物形成凋亡小体,这可以通过电子显微镜观察到。还有一种变化是细胞膜破损外翻,这可以用标记细胞膜内侧的染料来检测,配合检测细胞核内物质的染料进行双染,判断细胞凋亡的进程。 ᠁nnexin V-PI染色的原理 Annexin V是一种钙依赖性磷脂结合蛋白,能够特异性结合凋亡细胞膜外层的磷脂酰丝氨酸。正常细胞的磷脂酰丝氨酸位于细胞膜磷脂双分子层的内层,而凋亡细胞的磷脂酰丝氨酸则位于外层。因此,Annexin V可以通过钙依赖的方式结合凋亡细胞的磷脂酰丝氨酸。 ꠦ作流程 制备细胞悬液:用不含EDTA的胰酶消化细胞,制备细胞悬液,2000rpm离心5分钟,弃上清。 洗细胞:用PBS洗一次,再用1x binding buffer洗一次。 调整细胞浓度:使用1x binding buffer将细胞浓度调整为1-5x10^6/ml。 Annexin V染色:取100ul细胞悬液,加入5ul荧光标记的Annexin V,室温避光孵育10-15分钟。 洗细胞:用1x binding buffer洗一次,200rpm离心5分钟,200ul 1x binding buffer重悬细胞。 PI染色:加入5ul PI,混匀。 流式测定:使用专用软件分析流式数据,得到凋亡细胞比例。 数据处理与绘图 定量分析:使用专用软件分析流式数据(可以使用flowJo),得到凋亡细胞比例。将3次独立重复的数据都分析完后进行统计分析并绘制柱状图。 读图指南:在Annexin V-PI染色中,PI+细胞碎片代表晚期凋亡细胞,Annexin V+ PI-代表早期凋亡细胞,Annexin V+ PI+代表正常细胞。 젥𞋥析 例如,Jurkat细胞在经过抗Fas抗体处理后,可以通过Annexin V-PI染色来检测细胞的凋亡情况。通过对比不同处理条件下的细胞染色结果,可以定量分析细胞的凋亡比例。 小贴士 在进行Annexin V-PI染色时,建议多加一组未染色的组,以便于寻找目标细胞群。 在实验设计时,可以考虑添加阴性对照和空白对照,以增加实验的可信度。 通过这些步骤和技巧,你可以精确地检测到细胞的凋亡情况,为生物学研究和药物开发提供有力支持。
透射电子显微镜(TEM)全解析 透射电子显微镜(TEM)是一种强大的科研工具,用于观察和分析材料内部的微观结构。以下是关于TEM的详细解析: 1️⃣ 仪器型号: 日本电子/JEOL JEM-2100 日本电子/JEOL JEM-F200 日本日立/HITACHI HT7800 (120kV) 美国赛默飞 FEI TF20 2️⃣ 原理与应用: TEM利用聚焦电子束投射到非常薄的样品上,通过透射或衍射电子束形成的图像来分析样品内部的微观组织结构。 3️⃣ 测试项目: 表面形貌 EDS能谱:点扫、线扫、面扫/Mapping HAADF(STEM) 衍射 4️⃣ 样品要求: 样品状态:粉末、块状/薄膜、液体样品均可测试。 块状/薄膜样品不能直接拍摄,需另行制样(如离子减薄、包埋切片、FIB等),样品厚度不超过100nm。 一般制样选普通铜网或微栅铜网,颗粒直径<10nm选超薄碳膜。若含Cu,拍摄EDS能谱和Mapping可选镍网或钼网等。 常用溶剂为乙醇,其次是水(易挥发且不会在碳膜上留下痕迹),其他溶剂请自备(如甲苯、丙酮等较易在碳膜上留下印迹)。 超声一般默认是5min。 5️⃣ 注意事项: 安全性:无毒、无放射性。 是否含有有机物:有机物在高压下不稳定,拍摄过程中极易被打散,样品被打散的同时会污染到仪器。如需拍摄,请务必与测试老师确认。带有机物的样品,无法拍摄Mapping。 磁性:磁性颗粒易吸附到极靴上,原则上电镜不拍磁性样品。但不同设备、测试老师不同的样品处理经验下,对所拍样品中磁性强弱的接受度不同。磁性样品包括含铁、钴、镍、锰等磁性元素的材料。注意,磁性分硬磁和软磁,有些材料对外不表现磁性,但加磁场后容易磁化,受热后磁性增强也需要定义为磁性样品。强磁:吸铁石能吸起来的样品。弱磁:吸铁石吸不起来但按前述定义为磁性的样品。 6️⃣ 结果展示: TEM图像展示了样品的微观结构,通过这些图像可以分析材料的性质和变化。 通过以上信息,您可以更好地了解透射电子显微镜的应用和操作注意事项,从而更好地利用这一强大的科研工具。
《纳米世界》探秘,孩子必看! 《纳米世界》是一本专为4-13岁孩子设计的理化启蒙书,引领他们探索未来的科技奥秘。 合年龄:4-13岁 ✅内容丰富!这本书以纳米技术为主题,从物质的理化组成开始讲解。 了原子、分子的概念;元素的含义;元素构成与材料性质的关系;如何用纳米技术制造新材料;纳米材料的应用;纳米技术的展望等,知识脉络清晰。 ✅插画风格独特!虽然电子显微镜下的“纳米世界”是黑白的,但插画家用丰富的想象力为这个微小世界增添了色彩,帮助我们理解纳米科技知识。 作者运用了许多有趣的类比,用日常事物解释复杂的科学概念,降低了理解难度。 如,作者将纳米技术比作积木游戏,解释了万物是由粒子组成的抽象概念,让孩子更容易理解纳米技术的工作原理。 ✅专家推荐!本书作者杰丝ⷩ楾𗦘樂訋𝥸国理工学院的实验室工作的优秀科学家。这本书引进国内后,受到了中科院理化所博导、中科院超晶格国家重点实验室青年工作者的热情推荐。 科学家已经利用纳米技术研究出许多独特的新材料,应用于医疗、通信、机械等领域。未来,纳米技术将继续改变我们的生活。 这本书非常适合作为孩子的科普教育读物。
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