sigma-aldrich解读_sigma-aldrich是哪个国家的品牌(2024年12月精选)
胶原蛋白包被培养皿的详细步骤늓igma-Aldrich推荐的胶原蛋白包被培养皿步骤 胶原蛋白储存液的制备 将0.1%(w/v)的胶原蛋白溶解在0.1M醋酸中。具体步骤如下: 0.1M醋酸溶液:V=1000mL=5.720ml醋酸+994.280ml ddH2O V=100mL=0.572ml醋酸+99.400ml ddH2O V=10ml=0.06ml醋酸+9.94ml ddH2O(60ul+9940ul) 将胶原蛋白粉末(1mg/ml)溶解在醋酸中,具体操作如下: V=100ml=0.1g胶原蛋白+100ml 0.1M醋酸 V=10ml=0.01g胶原蛋白+10ml 0.1M醋酸 将上层胶原蛋白溶液转移到无菌容器中(无菌操作,50ml离心管分装),4℃保存。注意:如果使用滤膜过滤除菌,会导致蛋白量损失。 工作液的制备 蛋白工作液(200ug/ml,5倍稀释)=1ml存储液(1mg/ml)+4ml ddH2O 包被步骤 根据包被面积计算所需包被液体体积,以6-10ug/cmⲦ细胞培养皿中加入胶原蛋白工作液,完全覆盖表面即可。以T-25培养瓶为例(工作液加入1ml): 所需胶原蛋白总量=25cmⲪ(6-10)ug/cmⲽ(150-250)ug 所需胶原蛋白体积=(150-250)ug/ 1000ug/ml=(0.15-0.25)ml 干燥包被好的培养皿表面可以经过UV照射过夜灭菌。 清洗步骤 在接种细胞前,可用无菌的平衡盐溶液洗涤细胞皿表面3次,用培养基洗涤1次。 适用范围 I型胶原包被的培养皿可应用于细胞的贴壁、粘附与伸展;HEK-293;HepG2细胞培养等。
实验室必备:标液试剂耗材选购指南 实验室必备 | 标液试剂耗材大揭秘! 背景知识: 在实验室中,标液试剂耗材是确保实验数据准确性和可靠性的关键。选择合适的标液试剂耗材时,需要考虑其质量、稳定性、准确性和适用性等因素。 ᦎ訍产品: 1️⃣ 标液:推荐使用进口品牌,如德国默克、美国Sigma-Aldrich等,这些品牌的标液具有高纯度、稳定性好、准确性高等优点。 2️⃣ 试剂:推荐使用国产优质品牌,如上海生工、北京伊诺凯等,这些品牌的试剂价格适中,质量可靠,适用于各种实验需求。 3️⃣ 耗材:推荐使用一次性塑料耗材,如移液管、试管、吸头等,这些耗材具有使用方便、成本低、环保等优点。 ᨴ 1️⃣ 选择正规渠道购买,确保产品质量。 2️⃣ 根据实验需求选择合适的规格和数量。 3️⃣ 注意产品的保质期和储存条件。 4️⃣ 可以参考其他实验室的使用经验,选择性价比高的产品。 总结: 优质的标液试剂耗材是实验室工作的基础,选择合适的产品能够提高实验效率和准确性。希望这篇指南能帮助大家找到适合自己的标液试剂耗材,祝大家实验顺利!ꀀ
实验室常见试剂品牌大盘点,你用过哪些? 在实验室里,选择合适的试剂品牌可是个大学问。国内外的知名品牌琳琅满目,下面就给大家盘点一下那些你可能会用到的试剂品牌。 国内品牌 阿达玛斯:这个品牌在化学试剂领域可是老牌劲旅,品质有保障。 通用试剂:名字就很实在,试剂种类齐全,性价比高。 阿拉丁:以提供高质量的试剂和优质服务著称。 安耐吉:专注于提供各种精细化学品。 毕得:产品线丰富,适合各种实验需求。 百灵威:在有机化学领域有很强的实力。 国药试剂:国内知名制药企业,试剂质量可靠。 乐研:专注于实验室耗材和试剂的研发与生产。 麦克林:提供各种定制化试剂,满足特殊实验需求。 韶远:在化学试剂领域有着深厚的技术积累。 延伸:产品线覆盖广泛,适合多种实验项目。 腾骞:专注于新型试剂的研发,创新能力很强。 凯瑜琳:提供各种高纯度试剂,品质上乘。 国外品牌 Acros:在化学试剂领域有着悠久的历史和丰富的产品线。 Alfa Aesar:专注于提供高质量的化学试剂和材料。 Merck:全球知名的制药和化学品公司,试剂质量有保障。 Sigma-Aldrich:在化学试剂领域有着强大的实力和广泛的应用。 实验室里,选择合适的试剂品牌不仅能提高实验效率,还能确保实验结果的准确性。希望这些信息对你有所帮助!좜耀
烟草叶片Co-IP实验,一文搞定! 嘿,大家好!今天我要和大家分享一下如何在烟草叶片中进行瞬时表达和免疫共沉淀(Co-IP)实验的详细步骤。这个实验流程真的是相当复杂,但只要按照步骤来,其实也没那么难。准备好了吗?Let's go! 材料和试剂 首先,你需要准备一些材料和试剂。以下是你需要的东西: 烟草种子:选那种生长在22℃下四周龄左右的烟草。 农杆菌菌株:已经转入双元载体的农杆菌,比如pCAMBIA1300、pBIN19等,靶基因带有蛋白标签,这里以3㗆LAG标签为例。 乙酰丁香酮(Sigma-Aldrich,目录号:D134406):诱导剂。 MES(pH5.6)(Sigma-Aldrich,目录号:M8250):调节pH值。 蛋白酶抑制剂(Roche,目录号:04693132001):防止蛋白降解。 NP-40(Fluka,目录号:74385):用于提取蛋白。 诱导培养基:具体配方见图二。 侵染培养液:具体配方见图三。 提取缓冲液:和诱导培养基、侵染培养液一样。 TBS:和提取缓冲液一样。 4㗓DS:和提取缓冲液一样。 设备 犦夸来是需要的设备: Anti-FLAG珠(Sigma-Aldrich,目录号:A2220):用于免疫沉淀。 3㗆LAG多肽(Sigma-Aldrich,目录号:F3290):用于检测FLAG标签的蛋白。 蛋白G琼脂糖珠(GE,目录号:17-0618-01):用于免疫沉淀。 农杆菌培养用的试管、摇床等。 离心机。 1mL注射器。 实验步骤 好了,材料和设备都准备好了,接下来就是实验步骤啦! 准备工作:首先,选生长在22℃(16h光照/8h黑暗)四周龄左右的烟草。将带有3㗆LAG标签的农杆菌菌株在3mL含有相应抗生素的LB液体培养基中28℃、200rpm过夜培养。 诱导培养基准备:将LB培养基中的农杆菌接种到诱导培养基中(过夜培养物按1/100稀释,或者培养8h的培养物按1/25稀释)。可以在早上准备好后当晚进行侵染,或者在晚上准备好后第二天早上做侵染。 农杆菌培养:28℃、200rpm培养8-12小时,使农杆菌细胞处于对数生长期,OD=0.6-0.8。 离心:将农杆菌培养物在50mL离心管中以3200㗧的速度离心10分钟。 侵染培养液准备:准备好侵染培养液,在5-10mL的侵染培养液中重悬农杆菌沉淀。 重悬农杆菌:使农杆菌重悬液的OD=0.1-0.3,每片叶子准备1mL重悬液即可。如果你想表达两种及以上蛋白,将每种农杆菌调好OD后混合即可。对于不同的质粒,推荐先进行预实验,通过调节OD值来控制蛋白的表达量,例如用更高OD的农杆菌来表达低丰度蛋白,用更低OD的农杆菌来表达高丰度的蛋白。 小结 好了,这就是整个实验的详细流程啦!希望对大家有所帮助。免疫共沉淀实验虽然复杂,但只要按照步骤来,其实也没那么难。祝大家实验顺利!如果有任何问题,欢迎留言讨论哦!
20种精油驱蚊效果对比,丁香肉桂最有效 在美国,注册新的驱虫剂或杀虫剂是一个既费时又费钱的过程。因此,使用天然原料对厂商和消费者都极具吸引力。最近,研究人员进行了一项人体实验,探讨了20种精油的驱蚊和驱蜱虫效果。 这些精油来自默克Merck大药厂旗下的Sigma-Aldrich生命科学试剂项目,使用浓度为10%,并用水无香乳液基底稀释。实验设计经过了新墨西哥州大学道德委员会的审核。 实验结果显示,这些精油的完全保护时间(CPTs)差异很大,且难以媲美对照组的10% DEET避蚊胺,其CPTs长达6小时。以下是部分精油的驱蚊效果: 蓖麻油(Castor) 德克萨斯雪松(Cedarwood, Texas) 肉桂(Cinnamon) 爪哇香茅(Citronella, Java) 丁香(Clove) 玉米油(Corn) 亚洲薄荷(Cornmint) 棉籽油(Cottonseed) 大蒜(Garlic) 香叶醇(Geraniol) 天竺葵(Geranium) 柠檬草(Lemongrass) 亚麻籽油(Linseed) 椒样薄荷(Peppermint) 2-苯乙基丙酸酯(2-Phenylethyl propionate,一种香料成分,存在于花生中,在美国被认为是一种“风险最小的杀虫剂”,无需任何登记即可用作杀虫剂) 迷迭香(Rosemary) 芝麻油(Sesame) 大豆油(Soybean) 留兰香(Spearmint) 百里香(Thyme) 其中,丁香和肉桂的驱蚊效果最为显著,CPTs仅能超过100分钟。研究人员对未来仍然保持乐观态度,认为这些化合物混合时有可能产生协调作用,有望找出一种浓度不超过10%、对蚊子和蜱虫的CPTs能超过3小时的配方。
细胞培养与免疫荧光染色全攻略 一、细胞接种 슥覗 菌条件下,打开Slide I biTreat的包装,并将其放在Slide滑架上。 使用移液枪向通道中加入100 3㗱0^5 cells/mL Rat1细胞悬液。 用提供的盖子轻轻盖住储液池,但不要完全密闭。 将滑架放入培养箱中培养(37℃;5% CO2)60分钟,使细胞贴壁。然后向两个储液池中每池加入0.5 mL的无细胞培养基。 孵育过夜。 二、细胞固定 犤觧ꥐ𘥎覶 中的全部培养基。 用1 mL杜氏磷酸盐缓冲液缓慢加入一个空储液池中,并从另一个储液池中吸出,不要一次性吸去整个通道中的液体。 用同样的方法加入约200 的3.7%多聚甲醛(用磷酸盐缓冲液配制)以固定细胞。从通道的另一侧吸去储液池中的内容物,等待10分钟。 三、破膜与封闭 按照步骤5所述,用1 mL磷酸盐缓冲液再次洗涤细胞。 用约200 0.1% Triton X-100破膜液(用磷酸盐缓冲液配制)处理细胞3-5分钟。 用磷酸盐缓冲液洗涤细胞。 用约200 1% BSA封闭液(用磷酸盐缓冲液配制)处理细胞20分钟。 用适量磷酸盐缓冲液洗涤细胞。 四、染色与封片 芥𘥎道中的所有液体,不要使通道干燥。 使用100 Alexa Fluor 488鬼笔环肽(1 U鬼笔环肽+ 500 磷酸盐缓冲液+1% BSA封闭液,购自Invitrogen公司)并在室温下培养20分钟。 用磷酸盐缓冲液洗涤细胞并清空通道。 使用100 DAPI(0.1 /mL,购自Sigma-Aldrich公司)染色3-5分钟。 用磷酸盐缓冲液洗涤细胞,并去除所有液体。使用滴管瓶在储液池中注入100 ibidi封片剂。用随附的盖子密闭储液池。 在荧光显微镜下用适当的滤光片组观察细胞。
细胞培养与免疫荧光染色全攻略 ### 一、细胞接种 슥覗 菌条件下,打开Slide I biTreat的包装,并将其放在Slide滑架上。 用移液枪向通道中加入100 的3㗱0^5 cells/mL Rat1细胞悬液。 用提供的盖子轻轻盖住储液池,但不要完全密闭。 将滑架放入培养箱中培养(37℃;5% CO2)60分钟,让细胞贴壁。然后向两个储液池中每池加入0.5 mL的无细胞培养基。 孵育过夜。 二、细胞固定 犤觧ꥐ𘥎覶 中的全部培养基。 用1 mL的杜氏磷酸盐缓冲液(Dulbecco’s PBS)清洗细胞,方法是将1 mL PBS缓慢加入一个空储液池中,并从另一个储液池中吸出。不要一次性吸去整个通道中的液体。 用同样的方法加入约200 的3.7%多聚甲醛(用磷酸盐缓冲液配制)以固定细胞。从通道的另一侧吸去储液池中的内容物,等待10分钟。 三、破膜与封闭 按照步骤5所述,用1 mL磷酸盐缓冲液再次洗涤细胞。 用约200 的0.1% Triton X-100破膜液(用磷酸盐缓冲液配制)处理细胞3-5分钟。 用磷酸盐缓冲液洗涤细胞。 用约200 的1% BSA封闭液(用磷酸盐缓冲液配制)处理细胞20分钟。 用适量磷酸盐缓冲液洗涤细胞。 四、染色与封片 芥𘥎道中的所有液体。从通道中吸去液体后,不要使通道干燥。 使用100 的Alexa Fluor 488鬼笔环肽(1 U鬼笔环肽+ 500 磷酸盐缓冲液+1% BSA封闭液,购自Invitrogen公司),并在室温下培养20分钟。 用磷酸盐缓冲液洗涤细胞并清空通道。 使用100 的DAPI(0.1 /mL,购自Sigma-Aldrich公司)染色3-5分钟。 用磷酸盐缓冲液洗涤细胞,并去除所有液体。使用滴管瓶在储液池中注入100 ibidi封片剂。用随附的盖子密闭储液池。 在荧光显微镜下用适当的滤光片组观察细胞。
芝兰春健康品牌质量怎么样 培养基是微生物学和细胞生物学研究中的重要工具,选择一个好的培养基品牌至关重要。以下是2023年培养基十大品牌的排行榜,帮助您做出明智的选择。 Gibco赛默飞世尔科技(中国)有限公司 全球生命科学领域的知名品牌,专注于培养基、血清、补充剂、细胞和细胞培养试剂等产品的研发和生产。 Cytiva HyClone 成立于1967年,Cytiva旗下子品牌,主要从事细胞培养和相关产品的开发、制造及服务。 SigmaAldrich西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司 生命科学领域的佼佼者,提供实验室用品、生产材料产品和技术支持。 澳斯康生物(南通)股份有限公司 实验室耗材行业的翘楚,集原材料、耗材、制药装备、技术服务及合同生产于一体。 上海奥浦迈生物科技股份有限公司 成立于2013年,专业从事细胞培养技术开发和生物制药委托开发生产服务。 上海倍谙基生物科技有限公司 创立于2014年,提供从细胞培养工艺开发与优化到培养基加工制造的高品质服务。 北京百因诺生物科技有限公司 生物培养基行业知名品牌,主要从事生物药CDMO及培养基的技术开发和生产。 龙沙(上海)国际贸易有限公司 始于1897年,源自瑞士的医疗解决方案提供商,产品涵盖生命科学研究、生物制药研发、生产和质量控制相关试剂、耗材、仪器和软件。 天信和(苏州)生物科技有限公司 国药集团中国生物旗下子公司,专注于个性化细胞培养基研究和生产,以及生物反应器工艺化设计及制造。 碧爱欧(上海)贸易有限公司 加拿大知名生物科技企业,主营细胞培养基和细胞分选产品、细胞冻存液、细胞因子和实验室仪器等。 以上品牌在培养基领域有着丰富的经验和卓越的产品质量,选择适合自己的品牌可以帮助您在科研工作中取得更好的成果。
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